问题补充说明:请问:做荧光定量PCR时,△△Ct值是什么意思,它的计算公式是什么?△△Ct与Ct目的基因和Ct内参基因有什么关系?... 请问:做荧光定量PCR时,△△Ct值是什么意思,它的计算公式是什么?△△Ct与Ct目的基因和Ct内参基因有什么关系? 展开
△差育鱼传流都燃双茶略乐△Ct是荧光定银睁神量计算公式的简化形式,用于比较不现五促兴这孩督同样品之间的差别或变化比率。
Ct=-1/lg(1+Ex)*lgX₀+lgN/lg(1+Ex),其中,n为扩增反应的循环次数,X₀为初始模板量,Ex为扩增入白征灯配南效率,N为荧光扩增信号达到阈值强度时扩增产物的量。△Ct(n)=Ct(目的基因)女越步灯把激生顺-Ct(内参基因);△△CT(n)=△Ct(n)-△Ct(1)。
起始来自拷贝数越多,Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,其中横坐标代表起始拷贝数的对数,纵坐标代Ct值。因此,只要获得未知样创盟湖但手增品的Ct值,即可360问答从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。
扩展资料
荧光定量PCR的原理:
荧光定量PCR技术:在PCR反应体系中加入荧光还现半句远注算基团,通过荧光信号不断累早世积而实现实时监测PCR全程,然后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。在实时锋亏荧光定量PCR中,对讨月全程PCR扩增过程进行实时检测答青鲁差严候降,根据反应时间和荧光信号的变化可以绘制成一条曲线。
实时荧光定量常用的荧光化学分类有SYB白图考铁易煤运RGreenI法和TagMan探针法。
Ct值:C代表Cycle,t代表threshold,Ct值的含义是每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数。
参考资料来源:百度百科-荧光定量PCR
参考资料来源:百度百科-实时荧光定量PCR
标签:PCR,Ct,计算公式