腰椎穿刺最常见的部位是在腰3~4椎体间隙。
患者通常采用侧卧位，一般都会采用右侧卧位，患者躬腰抱膝，尽量张开椎间隙，用9号或7号腰穿针，穿刺针垂直于皮肤，略向骶尾部歪斜，依次穿破皮肤，皮下软组织，棘上韧带，棘间韧带，黄韧带，硬脊膜，穿破硬脊膜时，有一定的突破感，进入脊髓蛛网膜下腔，正常情况下，脊髓蛛网膜下腔存在脑脊液，具有一定压力，此时拔出针芯，可从穿刺针有脑脊液流出，可以测定脑脊液压力，及留取脑脊液标本，做化验检查用，将针芯固定于穿刺针内，拔针包扎固定，腰穿成功。
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